Сообщение
Познышев Вадим » 15 мар 2007, 22:10
2.Морфология.
Использование оригинальной методики выращивания бактерий с последующим изучением в сканирующем электронном микроскопе позволило впервые изучить морфологию клеток S. enteritidis в популяции без нарушения архитектоники колоний. Культивирование S. enteritidis при 22 и 37 градусах выявило наличие преимущественно гладких, S – форм колоний с ровными краями, в то время как при 10 и 40 градусах выявились шероховатые, R – формы колоний.
Следует, также, отметить, что на краю S и R – колоний были обнаружены различные формы клеток, находящиеся в стадии гетероморфного роста, особенно они преобладали в R - колониях. на ультратонких срезах клетки из S - колоний имели типичную для сальмонелл морфологию: удлинённую форму и закруглённые концы на продольных срезах и округлённую форму на поперечных. Местами выявлялись клетки, находящиеся в ассоциации. В отдельных участках вблизи клеток наблюдали единичные фрагменты жгутиков, которые имели толщину 22 нм.
Ультраструктура S. enteritidis была представлена: клеточной стенкой, имеющей извилистый профиль, состоящий из трёхслойной наружной мембраны толщиной 8-9 нм и подлежащего слоя низкой электронной плотности, имеющего непостоянную толщину. Мембрана клеточной стенки имела ассиметричное строение: наружный осмифильный слой её был более контрастный и имел большую толщину, чем внутренний.
Цитоплазматическая мембрана бактерий имела трёхслойное строение и плотно прилегала к цитоплазме, толщина её достигала 7-8 нм. В отличие от наружной мембраны клеточной стенки она имела симметричное строение. Цитоплазма клеток была представлена гранулярным компонентом. Наряду с мелкими гранулами, размером 1 – 1.5 нм, выявлялись полирибосомы. В цитоплазме можно было наблюдать включения, имеющие мелкозернистое строение.
Вдоль продольной оси клетки располагался нуклеотид, его величина и форма определялись плоскостью среза. Он был представлен осмиофобной зоной, заполненной густой сетью осмиофильных тонких нитей ДНК. Деление клеток осуществлялось путём простой перетяжки. В отдельных участках колоний наряду с типичными клетками, выявлялись гетероморфные, свойственные L – трансформации.
Несомненный интерес представило исследование популяции S. enteritidis, выделенной из воды на 544 суток, при хранении её в различных сезонах года. На сканнограммах отмечалась типичная R – форма колоний с шероховатыми краями. От края колоний отходили длинные трубчатые тяжи, имеющие продольную исчерченность, которые, по мере удаления от колонии, нередко утолщались. Выявлялась, также, связь тяжей с микроколониями. На поверхности тяжей наблюдались мелкие шаровидные клетки, а также мелкие палочковидные формы, почкующиеся сферопласты. Нередко можно было наблюдать по поверхности тяжей и по периферии целые грозди шаровидных клеток.
В процессе исследования вышеуказанных клеток в популяции были выявлены основные стадии гетероморфного роста: клетки с типичным строением; клетки с дефектной клеточной стенкой; мелкие шаровидные клетки, лишённые клеточной стенки; сферопласты; гигантские тела; реверсирующие клетки. Подобные морфологические формы бактерий были описаны у L – форм других микроорганизмов, в частности у K. rhinoseleromatis (Чеснокова А.А. 1974 год) , Pr.
vulgaris, Br. abortus, Str. pyogenes, Bac. subtilis, S. aureus, Myc. tuberculosis ( Прозоровский С.В.), Listeria monocytogenes ( Высоцкий В.В., Котлярова Г.А.), P. vulgaris, K. pneumoniae ( Павлова И.Б.).
Результаты исследований позволяют заключить, что наблюдаемый гетероморфный рост в колониях S. enteritidis имеющий различную степень проявления, является отражением изменчивости, а следовательно высокой приспособленности бактерий к условиям окружающей среды.
Введение.